![【Mirus新品推荐】TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent 【Mirus新品推荐】TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent](https://0.rc.xiniu.com/g3/M00/BE/FB/CgAH6GCLUCKAaodrAAWk_ho_8BA309.png)
Mirus公司新推出转染试剂TransIT-VirusGEN® Transfection Reagent,该产品旨在增强载体转染到
贴壁或悬浮的HEK 293细胞的转染效率,并增加重组腺相关病毒或慢病毒的产量。
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使用TransIT-VirusGEN®转染试剂转染悬浮或贴壁HEK293细胞可获得最高的转染效率。使用不同的转
染试剂将pAAV-hrGFP,pAAV-RC和pAAV-Helper(按照1:1:1比率,1.5μg,Agilent)转染到悬浮
Ffeestyle –F细胞(培养于FreeStyleTM F17培养基, A)和贴壁的293T / 17细胞(B)中:TransIT-Vir
usGEN(2:1, vol:wt),Lipofectamine 2000(3:1),Lipofectamine 3000(3:3:1)和25kDa PEI
(4:1)。收获的病毒用于转导HT1080细胞,转导后48h后,使用guava easyCyte TM 5HT流式细胞
仪检测GFP的表达。功能性滴度根据病毒的稀释液与20% GFP阳性细胞进行计算。
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使用TransIT-VirusGEN®转染试剂转染悬浮或贴壁HEK293细胞可获得最高的转染效率。使用不同的转
染试剂将pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP TM载体和Lentivirus慢病毒混合物(1:1)转染到悬浮Ffeest
yle –F细胞(培养于FreeStyleTM F17培养基, A)和贴壁的293T / 17细胞(B)中: TransIT-VirusGE
N® (3:1, vol:wt), Lipofectamine® 2000 (2:1 (A)或 3:1 (B)), Lipofectamine® 3000 (2:2:1 (A) 或3:3:1
(B)) 和 25 kDa PEI (4:1)。收集上清液,过滤(0.45μm),使用293T / 17细胞滴定。 使用8μg/ ml Tr
ansduceIT TM进行慢病毒转导,导72h后使用guava easyCyte™ 5HT流式细胞仪检测GFP表达情况。
功能性滴度根据病毒的稀释液与20% GFP阳性细胞进行计算。
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TransIT-VirusGEN®转染试剂的强扩展性。使用TransIT-VirusGEN®转染试剂(2:1 (vol:wt), Mirus)
将pAAV-hrGFP,pAAV-RC和pAAV-Helper(按照1:1:1比率,1.5μg/ml,Agilent)转染到悬浮Ffee
style –F细胞(培养于FreeStyleTM F17培养基, A)和贴壁的293T / 17细胞(B)中。收获的病毒用于
转导HT1080细胞,转导后48h后,使用guava easyCyte TM 5HT流式细胞仪检测GFP的表达。功能性
滴度根据病毒的稀释液与20% GFP阳性细胞进行计算。
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